人可溶性細胞間粘附分子1ELISA試劑盒實驗原理
發(fā)表時間：2025-06-10
人可溶性細胞間粘附分子1（sICAM-1）ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法進行檢測，其核心原理是通過特異性抗體捕獲樣本中的目標蛋白，再借助酶標記的二抗與底物反應(yīng)產(chǎn)生信號，實現(xiàn)定量分析。
實驗過程中，首先將包被有抗sICAM-1單克隆抗體的微孔板與待測樣本孵育，樣本中的sICAM-1會與固相抗體結(jié)合形成免疫復合物。洗板去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入生物素標記的檢測抗體，該抗體與sICAM-1的另一表位結(jié)合，形成“抗體-抗原-抗體”夾心結(jié)構(gòu)。隨后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的鏈霉親和素，通過生物素-親和素的高親和力結(jié)合，進一步放大檢測信號。
最后，加入顯色底物TMB，在HRP催化下產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，其顏色深淺與樣本中sICAM-1濃度成正比。終止液終止反應(yīng)后，溶液變?yōu)辄S色，用酶標儀在450nm波長下測定吸光度值，通過標準曲線即可計算出樣本中sICAM-1的精確濃度。
該方法靈敏度高、特異性強，可廣泛應(yīng)用于炎癥、腫瘤、心血管疾病等研究領(lǐng)域，為探索sICAM-1在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用提供可靠工具。
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