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脂質體轉染法常用步驟

發(fā)表時間:2020-07-03

脂質體轉染法常用步驟

1. 轉染試劑的準備


① 將400ul去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。


② 震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,使用前還需震蕩。


2. 選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質體 體積:DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA,震蕩后在加入合適體積的轉染試劑,再次震蕩。


3. 將混合液在室溫放置10―15分鐘。


4. 吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,用PBS或者無血清培養(yǎng)基清洗一次。


5. 加入混合液,將細胞放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一個小時。


6. 到時后,根據(jù)細胞種類決定是否移除混合液,之后加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24-48小時。


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