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細胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法：
小鼠誘導(dǎo)型多能干細胞（iPS細胞）OSKZ-1（干細胞庫保藏）培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　小鼠誘導(dǎo)型多能干細胞（iPS細胞）OSKZ-1（干細胞庫保藏）培養(yǎng)
種屬:OSKZ-1

類型:小鼠胚胎成纖維細胞

形態(tài):球形*

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:小鼠iPS完全培養(yǎng)液（600ml）： DMEM (Invitrogen 12430) 485 ml ES級FBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml Nucleosides (Millipore ES-008-D) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl（終濃度為1000U/ml） β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml PS (Millipore TMS-AB2-C) 6 ml 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到小鼠誘導(dǎo)型多能干細胞（iPS細胞）OSKZ-1（干細胞庫保藏）培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是小鼠誘導(dǎo)型多能干細胞（iPS細胞）OSKZ-1（干細胞庫保藏）培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
抑霉唑標準溶液(100μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2%Imazalil solution  英文名稱RatFXELISAKit大鼠凝血因子X(FX)規(guī)格：96T/48T  犬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝

三氧化二鉻(>99%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%，BRChromium (III) oxide  活體細胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒20/400  山羊球蛋白A(IgA)試劑盒 Goat Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit

四氧化三鈷(>99%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%，BRCobalt (II, III ) oxide  ELISAKitPL/Fbn人纖溶酶/纖維蛋白溶酶規(guī)格：48T/96T  內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)ELISA試劑盒 ，英文名： GC ELISA Kit

乙酸鈷四水(>99.5%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,BRCobaltous acetate, tetrahydrate  小鼠肝配蛋白B2(EFNB2)ELISA試劑盒 ，英文名： EFNB2 ELISA Kit  rabbitansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
犬類胰蛋白酶試劑盒 Canine yptase ELISA Kit  65604-80-0麥冬皂苷D’規(guī)格  Ophiopogonin D’

英文名稱HumanAILR2(h)ELISAKIT人血小板生成素(TPO)規(guī)格：96T/48T  74805-92-8麥冬甲基黃烷酮A   Methylophiopogonanone A

化線粒體DNA萃取試劑盒20  15503-87-4光萼野百合堿說明書  Usaramine

RatinhibitorysubunitofNF-κBα,IKBαELISA試劑盒大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  156980-60-8羅漢果黃素品牌  Grosvenorine

小鼠早期生長應(yīng)答因子1(EGR1)ELISA試劑盒 ，英文名： EGR1 ELISA Kit  88901-37-5羅漢果皂苷Ⅲe規(guī)格  mogroside Ⅲe
20874-52-6柴胡皂苷D   Saikosaponin D   英文名稱RatPhosphoinositide-3kinaseELISAKit大鼠1脂酰肌醇三羥基激酶(PI3K)規(guī)格：96T/48T

2086-83-1小檗堿   Berberine  英文名稱RatPhosphoinositide-3kinaseELISAKit大鼠1脂酰肌醇三羥基激酶(PI3K)規(guī)格：96T/48T

20831-76-9龍膽苦苷品牌  Gentiopicroside  英文名稱RatPGFElisakit大鼠素F型(PGF)規(guī)格：96T/48T

20784-50-3補骨脂乙素品牌  Isobavachalcone    英文名稱RatPGFElisakit大鼠素F型(PGF)規(guī)格：96T/48T

20736-09-8柴胡皂苷A規(guī)格  Saikosaponin A   英文名稱RatPGE1ELISAKit大鼠素E1(PGE1)規(guī)格：96T/48T
小鼠誘導(dǎo)型多能干細胞（iPS細胞）OSKZ-1（干細胞庫保藏）培養(yǎng)小鼠周期素依賴性激酶8(CDK8)ELISA試劑盒 ，英文名： CDK8 ELISA Kit  62-46-4硫辛酸說明書  Lipoic acid

犬維生素E(VE)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminE,VEELISAKit 96T/48T  20831-76-9龍膽苦苷品牌  Gentiopicroside

犬透明質(zhì)酸(HA)試劑盒 Canine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit  153-18-4蘆丁規(guī)格  Rutin

英文名稱HumaumornecrosisfactorαELISAKIT人α(TNFα)ELISAKIT規(guī)格：96T/48T  481-72-1蘆薈大黃素   Aloeemodin

超氧化物歧化酶(SOD)細胞裂解樣品制備試劑盒50  1415-73-2蘆薈苷說明書  Aloin