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上海莼試生物技術(shù)有限公司
   
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產(chǎn)品展廳
小鼠胚胎干細(xì)胞(干細(xì)胞庫保藏)
  • 品牌:莼試
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:CSX4452
  • 發(fā)布日期: 2020-06-10
  • 更新日期: 2025-07-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件
品牌 莼試
貨號 CSX4452
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細(xì)胞形態(tài) 球形克隆
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 小鼠胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 詳見說明書
純度 詳見說明書%
是否進(jìn)口

小鼠胚胎干細(xì)胞(干細(xì)胞庫保藏) 冷凍保存細(xì)胞之方法:

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟:

資源名稱 小鼠胚胎干細(xì)胞(干細(xì)胞庫保藏)
種屬:ESF 158

類型:小鼠胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

形態(tài):球形*

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:mES完全培養(yǎng)液配方(600 ml): DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ESFBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl(終濃度為1000U/ml β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
細(xì)胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCCECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程:

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.
2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是小鼠胚胎干細(xì)胞(干細(xì)胞庫保藏) 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
吲哚-4-羧酸甲酯(>質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMethyl indole-4-carboxylate  ELISAKitLyme-IgG人萊姆IgG規(guī)格:48T/96T  RatCaveolin-1,Cav-1ELISAKIT 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

甲基綠(~65%,BS)質(zhì)量規(guī)格:~65%,BSMethylene green  chloride double salt  小鼠Ⅵ型膠原α1(COL6α1)ELISA試劑盒 ,英文名: COL6α1 ELISA Kit  CLIAKitforHpt/HPELISAKit大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白規(guī)格:48T/96T

亞甲紫3RAX(>90%,BS)質(zhì)量規(guī)格:>90%BSMethylene violet 3RAX  人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA檢測試劑盒HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISAKit 96T/48T  細(xì)胞PAK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

2-甲基琥珀酸(>質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMethylsuccinic acid  大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒 Rat Pulmonary surfacta-associated protein A,SP-A ELISA Kit  β2-GP1IgA/G/M大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M規(guī)格:48T/96T
小鼠粘蛋白2(MUC2)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC2 ELISA Kit  552-59-0櫻黃素說明書  Prunetin

白三烯C4(LTC4)ELISA檢測試劑盒MonkeyLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit 96T/48T  491-80-5鷹嘴豆芽素A品牌  Biochanin A

犬球蛋白A(IgA)試劑盒 Canine Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit  509-18-2硬飛燕草堿規(guī)格  Belsoline

英文名稱HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorELISAkit人血小板源性生長因子(PDGF-AB)規(guī)格:96T/48T  10236-47-2柚皮苷   naringin

化微粒體1脂酶D2(PhospholipaseD2)活性熒光定量檢測試劑盒20  480-41-1柚皮素說明書  Naringenin
25459-91-0去亞甲基小檗堿規(guī)格  Demethyleneberberine    英文名稱RatT4ELISAKit大鼠高敏甲狀腺素(T4)規(guī)格:96T/48T

25406-64-8莫諾苷品牌  Morroniside   英文名稱RatT4ELISAKit大鼠高敏甲狀腺素(T4)規(guī)格:96T/48T

24939-17-1去甲氧基姜黃素規(guī)格  Demethoxycurcumin  英文名稱RatT3ELISAKit大鼠三甲狀腺原氨酸(T3)ELISAKit規(guī)格:96T/48T

24699-16-9異芒果苷   Isomangiferin   英文名稱RatT3ELISAKit大鼠三甲狀腺原氨酸(T3)ELISAKit規(guī)格:96T/48T

24697-74-3鹽酸益母草堿說明書  Leonurine   英文名稱RatsubstancePreceptorELISAKit大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)規(guī)格:96T/48T
小鼠胚胎干細(xì)胞(干細(xì)胞庫保藏) 小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA試劑盒 ,英文名: Lpa ELISA Kit  13241-33-3新橙皮苷規(guī)格  Neohesperidin

猴抗抗體(LMA)ELISA檢測試劑盒Monkeyai-livercellmembraneaibody,LMAELISAKit 96T/48T  27210-57-7新丹參酮   miltirone

犬凝聚素(CLU)試劑盒 Dog clusterin,CLU ELISA Kit  906-33-2新綠原酸說明書  Neochlorogenic acid

英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP2ELISAKIT人樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)規(guī)格:96T/48T  64809-67-2新芒果苷品牌  Neomangiferin

化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pCMV5-RUNX3)10微克  93772-31-7新藤黃酸規(guī)格  Neogambogic acid
收到小鼠胚胎干細(xì)胞(干細(xì)胞庫保藏) 處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3
、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。


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