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上海莼試生物技術有限公司
   
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產品展廳
小鼠胚胎干細胞Oct4-Neo(干細胞庫保藏)培養(yǎng)
  • 品牌:莼試
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:CSX4450
  • 發(fā)布日期: 2020-06-10
  • 更新日期: 2025-07-10
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件
品牌 莼試
貨號 CSX4450
用途 公司產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 球形克隆
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 小鼠胚胎內細胞團
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 詳見說明書
純度 詳見說明書%
是否進口

資源名稱 小鼠胚胎干細胞Oct4-Neo(干細胞庫保藏)產品僅用于科研
種屬:Oct4-Neo

類型:小鼠胚胎內細胞團

形態(tài):球形*

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:mES完全培養(yǎng)液配方(600 ml): DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ESFBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl(終濃度為1000U/ml β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
小鼠胚胎干細胞Oct4-Neo(干細胞庫保藏)培養(yǎng)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZJCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

產品名稱

類型

佛號

小鼠胚胎干細胞Oct4-Neo(干細胞庫保藏)培養(yǎng)

小鼠胚胎內細胞團

CSX4450


培養(yǎng)操作步驟:
小鼠胚胎干細胞Oct4-Neo(干細胞庫保藏)培養(yǎng)1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2
.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3
.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
4
.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 
5
.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.
研究條件可以人為控制
pH
、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.
研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.
研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.
研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等; 
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.
研究的費用相對較經濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

操作流程:
產品僅用于科研1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293
細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1
細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37預熱,810倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37、5co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2
細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek293細胞48h換液1次,細胞長至60%70%融合時,用0.25%胰酶消化12min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3
細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4
細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104
1.5
細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于1225cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。 
1.6
生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線

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