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上海莼試生物技術有限公司
   
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產品展廳
小鼠胚胎干細胞E14TG2A(干細胞庫保藏)形態(tài)
  • 品牌:莼試
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:CSX4449
  • 發(fā)布日期: 2020-06-10
  • 更新日期: 2025-07-10
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件
品牌 莼試
貨號 CSX4449
用途 公司產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 球形克隆
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 小鼠胚胎內細胞團
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 詳見說明書
純度 詳見說明書%
是否進口

細胞培養(yǎng)過程:

產品僅用于科研冷凍保存細胞之方法:
小鼠胚胎干細胞E14TG2A(干細胞庫保藏)形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

資源名稱 小鼠胚胎干細胞E14TG2A(干細胞庫保藏)形態(tài)
種屬:E14TG2A

類型:小鼠胚胎內細胞團

形態(tài):球形*

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:mES完全培養(yǎng)液配方(600 ml): DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ESFBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl(終濃度為1000U/ml β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

細胞分類:
第一種:
是凍存產品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產品的質量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟:

細胞培養(yǎng)步驟:
產品僅用于科研一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1
)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)85%;北美胎牛血清(United StatesGIBCO,貨號16000-044),15%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1
)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.
2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.
6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

收到小鼠胚胎干細胞E14TG2A(干細胞庫保藏)形態(tài)處理方法
1
、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據)。
2
、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3
、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據);建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
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26342-66-5鬧羊花III規(guī)格  Rhodojaponin-III   英文名稱RatthrombieceptorELISAKit大鼠凝血酶受體()規(guī)格:96T/48T

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