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上海莼試生物技術(shù)有限公司
   
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產(chǎn)品展廳
人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)
  • 品牌:莼試
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:CSX4434
  • 發(fā)布日期: 2020-06-10
  • 更新日期: 2025-07-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件
品牌 莼試
貨號 CSX4434
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細(xì)胞形態(tài) 淋巴細(xì)胞樣
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 懸浮生長
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 詳見說明書
純度 詳見說明書%
是否進(jìn)口

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存細(xì)胞之方法:

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟:

資源名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)
種屬:CGM1

類型:淋巴母細(xì)胞

形態(tài):淋巴細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)90%;胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度。

生長特性:懸浮生長
細(xì)胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCCECACCDSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程:

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.
2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
硬脂酸丁酯(>Butyl stearate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR  小鼠雄激素受體(AR)ELISA試劑盒 ,英文名: AR ELISA Kit  ELISAKitTAFI小鼠纖溶抑制因子規(guī)格:48T/96T

C10E6,10%溶液C10E6質(zhì)量規(guī)格:BR  小鼠活化蛋白C(APC)ELISA檢測試劑盒MouseactivatedproteinC,APCELISAKit 96T/48T  Humancalmodulin,CAMELISAKit人鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

C12E10,10%溶液C12E10質(zhì)量規(guī)格:BR  人黃體生成素(LH)試劑盒 Human leinizing hormone,LH ELISA kit  人凝膠原蛋白(gelson)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

C12E9, 10%溶液C12E9質(zhì)量規(guī)格:BR  RatComplemefragme5a,C5aELISAKit大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  小鼠胃動素(MTL)試劑盒 Mouse Motilin,MTL ELISA Kit
小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA試劑盒 ,英文名: Lpa ELISA Kit  13241-33-3新橙皮苷規(guī)格  Neohesperidin

猴抗抗體(LMA)ELISA檢測試劑盒Monkeyai-livercellmembraneaibody,LMAELISAKit 96T/48T  27210-57-7新丹參酮   miltirone

犬凝聚素(CLU)試劑盒 Dog clusterin,CLU ELISA Kit  906-33-2新綠原酸說明書  Neochlorogenic acid

英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP2ELISAKIT人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)規(guī)格:96T/48T  64809-67-2新芒果苷品牌  Neomangiferin

化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pCMV5-RUNX3)10微克  93772-31-7新藤黃酸規(guī)格  Neogambogic acid
32619-42-4橄欖苦苷規(guī)格  Oleuropein   魚類組織元素?zé)晒舛繖z測試劑盒20

32451-88-0異綠原酸C規(guī)格  Isochlorogenic acid C  魚類主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA檢測試劑盒Fishmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit 96T/48T

32449-98-2Khasianine品牌  Khasianine   魚類受精卵細(xì)胞凍存試劑盒(低溫)50

31721-94-55,7-二羥基色原酮說明書  5,7-dihydroxychromone   魚類三甲狀腺原氨酸(T3)ELISA檢測試劑盒Fishi-iodothyronine,T3ELISAKit 96T/48T

31524-62-6異補(bǔ)骨脂二氫黃酮   Isobavachin   魚類皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA檢測試劑盒FishCoisolELISAKit 96T/48T
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測試劑盒MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T  63902-38-5松酯醇二葡萄糖苷品牌  Pinoresinol diglucoside

人聚集蛋白(Agrin)試劑盒 Human Agrin ELISA Kit  113146-74-0酸漿苦味素L規(guī)格  Physalin L

Ratadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit大鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  55466-04-1酸棗仁皂苷A   Jujuboside A

載玻片細(xì)胞TSH-BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  55466-05-2酸棗仁皂苷B說明書  Jujuboside B

Mouse25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  194851-84-8酸棗仁皂苷D品牌  Jujuboside D
收到EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3
、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。


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