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培養(yǎng)操作步驟：
黑白花奶牛牛肺細(xì)胞 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。產(chǎn)品僅用于科研 

資源名稱　黑白花奶牛牛肺細(xì)胞
種屬:DCL1

形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)15%NBS

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
紫杉醇質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,用于細(xì)胞培養(yǎng),藥劑造模Paclitaxel  ELISAKitHb-AGE人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格：48T/96T  熱休克蛋白22(HSP-22)ELISA試劑盒 ，英文名： HSP-22 ELISA Kit

紫杉醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Paclitaxel  小鼠色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： MC Ab ELISA Kit  rabbitadiponectin,ADPELISA試劑盒兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸帕洛諾司瓊質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Palonosetron HCl  大鼠色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 96T/48T  Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA試劑盒人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸巴龍霉素質(zhì)量規(guī)格：≥675 U/mg,USP28Paromomycin Sulfate  人波形蛋白(VIM)試劑盒 Human vimein ELISA Kit  HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
犬樣生長(zhǎng)因子II(IGF2)試劑盒 Dog Insulin-like growth factor II,IGF2 ELISA kit  α-菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷說明書  α-spinasteryl-3-O-β-D-glucoside

英文名稱Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgAELISAKit小鼠alpha-Fodrin抗體IgG/IgAELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  35790-95-5α－常春藤苷品牌  α-hederin

玻璃清潔劑(櫥窗、大門、汽車玻璃等)500毫升/瓶  463-40-1α-亞麻酸規(guī)格  α-Linolenic acid 

RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISA試劑盒大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  51317-08-9β-桉葉醇   β-Eudesmol

小鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒 ，英文名： cath-K ELISA Kit  83-46-5β-谷甾醇說明書  β-Sitosterol
94238-00-3西紅花苷I   Crocin I  組織含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20

94079-81-9金石蠶苷   Poliumoside   組織胱氨酸(cystine)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20

93772-31-7新藤黃酸規(guī)格  Neogambogic acid  組織灌注固著液(4%中性多聚甲固著液)50毫升

93675-88-8連翹酯苷E說明書  Forsythoside E    組織固著液(Bouin固著液)50毫升

93-39-0茵芋苷品牌  Skimmin  組織甘油激酶(Glycerolkinase)活性酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
黑白花奶牛牛肺細(xì)胞 RatAmylinELISAKit大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  22338-71-2遠(yuǎn)志酸   Polygalacic acid

載玻片細(xì)胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20  14259-46-2蕓香柚皮苷說明書   Narirutin

Mouseacetylcholine,ACHELISA試劑盒小鼠乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  18674-16-3澤瀉醇A-24-醋酸酯品牌   Alisol A 24-acetate

小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC5B ELISA Kit  26575-95-1澤瀉醇B-23-醋酸酯規(guī)格   Alisol B 23-acetate

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測(cè)試劑盒MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T  26575-93-9澤瀉醇C-23-醋酸酯    Alisol C monoacetate
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（ olympus imt-413），co2孵箱（yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。產(chǎn)品僅用于科研
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
黑白花奶牛牛肺細(xì)胞 來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。