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培養(yǎng)操作步驟：
人皮膚內皮細胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。產品僅用于科研 

資源名稱　人皮膚內皮細胞
種屬:HDMEC

類型:貼壁生長

形態(tài):內皮樣細胞

分離基物人，皮膚；微內皮細胞

安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS

生長條件:37℃，5%CO2

存儲條件:90%FBS+10%DMSO

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產品：
RTE(大鼠氣管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 A375(人類惡性色素瘤)Fmoc-O-叔丁基-L-酪酸，英文名或英文縮寫：Fmoc-Tyr(tBu)-OH，級別：特，98.5%，規(guī)格：500克

CL-0100HEC-1-B(人子宮內膜腺癌細胞)5×106cells/瓶×2勞森試劑 Lawesson reagent,97% 19172-47-5 5G 通用試劑

CSF2RB Others Rat 大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 人細胞裂解液 (陽性對照) 芴氧羰基-O-叔丁基-L-酪安醋 Fmoc-O-tqrt-butyl-L-tyrosinq 71989-38-3

人海馬趾星形膠質細胞裂解物HA-h LMYCOpxenOLICACID霉酚酸超級100MG24280-93-1COLD

OVCaR-3細胞，人細胞 菜青蟲卵巢細胞,Pr-HNV8細胞 神經膠質細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)(硝基四氮唑藍)
615小鼠株;Ca759路路通內酯（標準品）質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Liquidambaric lactone

CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘油三油酸酯（標準品）質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Glycerine trioleate

M14 人色素瘤細胞長春花堿（標準品）質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Vinblastine

MDA-MB-468人癌細胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS長春花堿質量規(guī)格：HPLC≥98%，BRVinblastine

FAM3B Protein Human 重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標簽)巖白菜素(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Bergenin
非洲綠猴腎細胞;CV-1α-基間二氮茚，英文名或英文縮寫：2-Aminobenzimidazole，級別：AR，99.5%，規(guī)格：100克

RKO-AS45-1細胞，人轉基因細胞 人惡性色素瘤細胞,A375細胞 人急性單核細胞細胞;THP-1加雷沙星 Garenoxacin,98% 194804-75-6 20MG 通用試劑

HEC-1-A(人子宮內膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2加醋;蟻醋 litxium forMctq 6108-3-

ANGPT2 Others Human 人 Angiopoietin-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 我妻氏培養(yǎng)基基礎shēng huà shì jì容量：RT，避光200毫升

人胚腎細胞;293 [HEK-293]PH緩沖液　PH6.0(20℃)NA
人皮膚內皮細胞說明書SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K(進分)Proteinase K質量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma分裝

CM-H025人*上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL蛋白酶K(Sigma)Proteinase K質量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma原裝

HuTu-80細胞，人十二指腸腺癌細胞 人色素瘤細胞,HME2細胞 人肝永生化細胞;THLE-3胰凝乳蛋白酶抑制劑Chymostatin質量規(guī)格：進分

H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞) 5×106cells/瓶×2亮抑蛋白酶肽(進口)Leupeptin 質量規(guī)格：≥95%,進口半硫酸鹽

CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細胞裂解液 (陽性對照) 胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑Pepstatin A microbial質量規(guī)格：≥90%,進分
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。產品僅用于科研
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線
人皮膚內皮細胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。