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資源名稱(chēng)　人肺微內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
種屬:HULEC-5a

類(lèi)型:貼壁生長(zhǎng)

形態(tài):上皮細(xì)胞樣

分離基物新生兒，肺

安全等級(jí):2

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MCDB 131(without L-Glutamine)+10ng/ml EGF+1μg/ml Hydrocortisone+10mM Glutamine+10% FBS+1% P/S

傳代方法:傳代比例：1:3-1:5，換液2 to 3 times per week

生長(zhǎng)條件:Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5% Temperature: 37℃

存儲(chǔ)條件:Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10% DMSO Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
人肺微內(nèi)皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
人肺微內(nèi)皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

操作流程：
產(chǎn)品僅用于科研1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

以下是公司正在在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
NRK-52E，大鼠腎細(xì)胞 Sars蛋白表達(dá)株，293sars181A細(xì)胞 NCI-H1703 [H1703](人細(xì)胞)鈥標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/mL,基體:10%HCL）質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體:10%HCLHolmium solution

人低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,介質(zhì)：1.0mol/L 硝酸）質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,介質(zhì)：1.0mol/L 硝酸 Iron resolution

BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 利福霉素鈉；利福霉素SV鈉質(zhì)量規(guī)格：>900IU/mg ,BRRifamycin  salt

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMYF醋酸奧曲肽質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BROctreotide acetate

PDGFC Others Mouse 小鼠 PDGF-C / SCDGF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) S(+)-2-氨基-1-丁醇質(zhì)量規(guī)格：>99%,液態(tài),0.944 g/mL ,25℃(S)-(+)-2-Amino-1-butanol
CHO-K1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株) 5×106cells/瓶×2 CL-0126JAR(人胎盤(pán)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 tTA基因修飾的小鼠(B類(lèi));P19-CAG-tTA-3C8氯舒隆(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Clorsulon

敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21L-抗壞血酸-2-1酸三鈉鹽；Vc1酸酯鈉質(zhì)量規(guī)格：>95% L-ascorbyl-2-phosphate

人肝細(xì)胞 (HH) (1×106 )IBMX, 3-異丁基-1-甲基質(zhì)量規(guī)格：>99%,美國(guó)進(jìn)口3-Isobutyl-1-methylanxthine

CL-0051CaES-17(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸普魯卡因質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRProcaine

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3);PA12 小鼠肺平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯普噻噸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRChlorprothixene
小鼠神經(jīng)質(zhì)細(xì)胞(MN-sn)(1×106)L-天冬素，英文名或英文縮寫(xiě)：L-Asparagine，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：10克

兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1植酸鈣鹽 Phytic acid calcium salt,≥90% 7776-28-5 1G 通用試劑

小鼠色素瘤細(xì)胞;B16-F1 小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL言醋非索非那定 Fqxofqncdinq xy7nochloridq 13842-1-8

HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系 Rattus8-Azaguanine癌散5毫克USP級(jí)，95%

ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 姆沙伯 107Chromosorb 107
人肺微內(nèi)皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)FBM細(xì)胞，胎兒骨髓間充質(zhì)細(xì)胞 *雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞(拉祜族);KM9406復(fù)壁碳納米管 20-40nm(直徑),1-2μm(長(zhǎng)度)Carbon Nanotube Multi-walled 20-40nm(diam.), 1-2μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)

U14(小鼠子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2復(fù)壁碳納米管 40-60nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>97%(TPO Method)

HT-29(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-N87 [N87]人細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMYM復(fù)壁碳納米管 40-60nm(直徑),1-2μm(長(zhǎng)度)Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 1-2μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)

人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2復(fù)壁碳納米管 60-100nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)Carbon Nanotube Multi-walled 60-100nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)

IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3,5-二芐氧基芐溴(>98.0%(GC)(T))3,5-Dibenzyloxybenzyl Bromide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)