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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
綿羊培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱(chēng)　綿羊培養(yǎng)
種屬：SheepL1

類(lèi)型：組織來(lái)源：肺

形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

分離基物：綿羊 雌

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：DMEM（內(nèi)含2mM L-glutamine）+10%胎牛血清(FBS).血清我們推薦用: GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。用質(zhì)量不好的血清不能保證此細(xì)胞會(huì)有好的生長(zhǎng)狀態(tài),并且傳代數(shù)不會(huì)很高.

生長(zhǎng)條件：培養(yǎng)條件：37.0C , CO2: 5%

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

存儲(chǔ)條件：凍存液：90%完全培養(yǎng)液，10%DMSO（細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)），現(xiàn)用現(xiàn)配。

細(xì)胞分類(lèi)：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到綿羊培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是綿羊培養(yǎng)的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品：
大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞;RIN-m5FN-(2-羧乙基)亞氨基二乙酸(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acid

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid

T-107A中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL皂土(膨潤(rùn)土)(Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑)質(zhì)量規(guī)格：Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑Bentonite

HEp-2細(xì)胞，人喉表皮樣癌細(xì)胞 人臍內(nèi)皮細(xì)胞,HUVE-12/CRL2480細(xì)胞 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21皂土(膨潤(rùn)土)(Bentone SD-2,適于中高極性溶劑)質(zhì)量規(guī)格：Bentone SD-2,適于中高極性溶劑Bentonite

C2C12(小鼠成肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2活性炭粉(AR,200目,粉末狀,褐色)質(zhì)量規(guī)格：AR,200目,粉末狀,褐色Activated charcoal
ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4,4'-(六氟異亞丙基)二酞1(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic Anhydride

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系*);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(T)3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride

RGMA Others Human 人 RGMA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三環(huán)[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic Dianhydride

A375 人惡性色素瘤細(xì)胞ε-己內(nèi)酯(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)ε-Caprolactone

C6-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦細(xì)胞 C6-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+2ug/ml puromycin四氫生物蝶呤(THB)二鹽酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Tetrahydrobiopterin (THB) di
CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫氫化鈉水合物，英文名或英文縮寫(xiě)：wo7ium xy7nosulfide hydrate，級(jí)別：3.5N，200-250目，規(guī)格：25克

MPC-83 *腺泡細(xì)胞癌尿酸鈉 Uric acid  salt 1198-77-2 1G 通用試劑

IMR-32人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 IMR-32 human neuroblastoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSL-半胱安醋酯言醋鹽 L-Cystqinq Mqthyl qstqr xy7nochloridq;Mqcystqinq xy7nochloridq;Mqthyl cystqinq xy7nochloridq;Mqthyl β-Mqrccptoclcninq xy7nochloridq;Mqthyl α-cMino-β-Mqrccptopropionctq xy7nochloridq;LJ-48 18298-63-2

THPO Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)氫氧化鉀shēng huà shì jì容量：500克

人上皮細(xì)胞;MCF-10A 人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL7235-40-7β-胡蘿卜素～1600U/MG(-20℃)beta-Carotene
綿羊培養(yǎng)人星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA NA氯硝柳胺Niclosamide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氯硝柳胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Niclosamide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

化大家鼠;NRm環(huán)丙沙星Ciprofloxacin質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

CRL細(xì)胞，人*癌細(xì)胞 人舌癌細(xì)胞,Tca-8113細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5環(huán)丙沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）Ciprofloxacin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2泛昔洛韋Famciclovir質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR