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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基:+5%DMSO+20%FBS |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3737 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | 圓形 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 懸浮生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
細胞培養(yǎng)過程:
產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法:
人T轉(zhuǎn)基因細胞形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
資源名稱 人T轉(zhuǎn)基因細胞形態(tài)
種屬:JurkatD,E
形態(tài):圓形
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法:1:3傳代;3~4天1次。
生長特性:懸浮生長
存儲條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基:+5%DMSO+20%FBS
細胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟:
細胞培養(yǎng)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
收到人T轉(zhuǎn)基因細胞形態(tài)處理方法
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是人T轉(zhuǎn)基因細胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
M-NFS-60 (小鼠細胞G-CSF依賴性) 5×106cells/瓶×2 腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2-氨基-6-巰基嘌呤-9-D-核苷水合物2-Amino-6-mercaptopurine-9-D-riboside Hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人Butt瘤細胞;RAJIS-甲基-3-硫代對乙酰氨基酚S-Methyl-3-thioacetaminophen質(zhì)量規(guī)格:美國進口
DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-羥基奈韋拉平2-Hydroxy Nevirapine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人胎盤滋養(yǎng)層細胞完全培養(yǎng)基 100mL3-羥基奈韋拉平3-Hydroxy Nevirapine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
SAC-II C3細胞,小鼠腹水瘤細胞 NRK(大鼠腎細胞) 人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-24-亞硝基磺胺甲惡唑4-Nitroso Sulfamethoxazole質(zhì)量規(guī)格:美國進口
NCI-H358(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)富馬酸酮替芬質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRKetotifen fumarate
CL-0464USMC(大鼠平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2富馬酸酮替芬(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Ketotifen fumarate
CD44 Others Human 人 CD44 人細胞裂解液 (陽性對照) 倍他米質(zhì)量規(guī)格:>98% Betamethasone
人肝內(nèi)膽管上皮細胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg倍他米(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98% ,標準品Betamethasone
5637(HTB-9)細胞,人細胞 大鼠細胞(癌細胞接種到*成瘤),Walker-256細胞 MLF, 小鼠成纖維細胞比阿培南質(zhì)量規(guī)格:度>97%Biapenem
人真皮成纖維母細胞-HDF-a2'-(二芐氨基)-6'-(二乙氨基)熒烷(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran
CGB5 Others Human 人 CGB5 人細胞裂解液 (陽性對照) 3',6'-二甲氧基熒烷(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)3',6'-Dimethoxyfluoran
家兔骨髓間充質(zhì)干細胞;2012083MSC1,1'-亞甲基二-2-萘酚(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)1,1'-Methylenedi-2-naphthol
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr- 細胞,TE-11細胞 B82細胞,鼠細胞系2-萘基芐基(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Benzyl 2-Naphthyl Ether
B16-F10, 小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞 Mouse5-溴吲哚 質(zhì)量規(guī)格:>99%5-Bromoindole
人T轉(zhuǎn)基因細胞形態(tài)Promocell C-26130 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 腎上皮細胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml羥乙基纖維素(20000~30000 mpa.s)Hydroxyethyl Cellulose質(zhì)量規(guī)格:粘度20000~30000 mpa.s
少突膠質(zhì)前體細胞培養(yǎng)基OPCM-prf羥乙基纖維素(5500-6500 mpa.s)Hydroxyethyl Cellulose質(zhì)量規(guī)格:粘度5500-6500 mpa.s
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 羥乙基纖維素(40~60 mpa.s)Hydroxyethyl Cellulose質(zhì)量規(guī)格:粘度40~60 mpa.s
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293 001A異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)Isopropyl β-D-thiogalactoside質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-1 膠質(zhì)母細胞瘤細胞,A172細胞 Tb 1 Lu細胞,蝙蝠肺細胞甘露糖;D-甘露糖D-Mannose質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR