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小鼠瘤株說明書冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　小鼠瘤株說明書
種屬:S180

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是小鼠瘤株說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
PDGFC Others Human 人 PDGF-C / SCDGF 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-異亮氨醇 L-Isoleucinol質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

CL-0105Hepa 1-6(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2L-甲狀腺素鈉鹽五水化合物L-Thyroxine  Salt Pentahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

HuH-7人細胞 細胞,LNCa細胞 MDA-MB-435S(癌細胞)LY2940680LY2940680質(zhì)量規(guī)格：>98%

小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albinoLY2886721 LY-2886721質(zhì)量規(guī)格：>98，BACE1 inhibitor

IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細胞裂解液 (陽性對照) 利尼伐尼；ABT869Linifanib (ABT-869)質(zhì)量規(guī)格：>98%，VEGFR/PDGFR抑制劑
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B磺胺嘧啶(標準品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定Sulfadiazine

ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺嘧啶質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRSulfadiazine

小鼠胚胎成纖維細胞;MEF炔諾孕酮（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Norgestrel

MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin (aa 296-580) 人細胞裂解液 (陽性對照) BML-275 HCl,物質(zhì)C鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,AMPK選擇性抑制劑Dorsomorphin 2HCl;BML275.HCL;Compound C

人小腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL黃楊堿/環(huán)維黃楊星D（標準品）質(zhì)量規(guī)格：滴定法≥99%，標準品Cyclovirobuxine
人非小細胞;NCI-H157L-α-N-乙?；?/span>-β-吲哚，英文名或英文縮寫：N-Acetyl-L-tryptophan，級別：BR，98%，規(guī)格：10克

IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 錄加醋芐酯 Bqnzyl xlonofonmctq 201-23-1

人肝星形細胞完全培養(yǎng)基 100mL葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-15 11081-40-6 25G 分離試劑

Lewis細胞，小鼠細胞 CHL/IU [ CHL-11 ](中國倉鼠肺細胞) 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A溴代十二烷基，英文名或英文縮寫：DTAB，級別：IND，規(guī)格：100克

XCL1 Protein Human 重組人 XCL1 蛋白 (His 標簽)Maleicacid 100g/250g/500g/1kg Sigma M0375
小鼠瘤株說明書MAPK14 Others Human 人 p38 alpha / MAPK14 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 水楊酸鎂（標準品）Magnesium salicylate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

B16-F10, 小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞司坦唑醇Stanozolol質(zhì)量規(guī)格：>94%,BR

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 人*癌細胞，NCL-H548細胞 MDCK (NBL-2)(狗腎細胞)司坦唑醇（標準品）Stanozolol質(zhì)量規(guī)格：含量測定

人惡性色素瘤細胞;A-375 [A375]苯妥英鈉（標準品）Phenytoin 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

TNFRSF17 Others Human 人 TNFRSF17 / BCMA / CD269 人細胞裂解液 (陽性對照) 辛可尼?。藴势罚?/span>Cinchonidine質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
收到小鼠瘤株說明書處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。