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細胞培養(yǎng)過程：

冷凍保存細胞之方法：
鼠頰黏膜鱗癌細胞形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　鼠頰黏膜鱗癌細胞形態(tài)
種屬：Rca-B

形態(tài)：上皮細胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生長特性：貼壁生長

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到鼠頰黏膜鱗癌細胞形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是鼠頰黏膜鱗癌細胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
P3X63Ag8.653細胞，細胞 耐長春新堿細胞系,HCT-8/VCR細胞 CM-H028人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mLN-Boc-N-去甲伊馬替尼N-Boc-N-Desmethyl Imatinib質(zhì)量規(guī)格：美國進口

正常大鼠腎細胞;NRK伊立替康標記物d10Irinotecan Labeled d10質(zhì)量規(guī)格：美國進口

REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-O-甲基-d3-鳥嘌呤6-O-Methyl-d3-guanine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基OKMN7-(2-氨基甲酰-2-羥乙基)鳥嘌呤N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-氨基-6,8-二羥基嘌呤鹽酸鹽2-Amino-6,8-dihydroxypurine 質(zhì)量規(guī)格：美國進口
RS1(大鼠皮膚成纖維樣細胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人單核細胞)梓醇（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Catalpol

CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細胞)5×106cells/瓶×2紫草素,左旋紫草素(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Shikonin

RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽性對照) 紫草酸（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Lithospermic acid

人內(nèi)皮細胞裂解物HLECL紫丁香酚苷（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Syringin

A2780/Taxol細胞，人紫杉醇耐藥株 鼠腹水單核細胞瘤,J774A.1細胞 組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml竹節(jié)參皂苷IVa（標準品）質(zhì)量規(guī)格：供含量測定用chikusetsu saponin Iva
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細胞;MuM-2B血清兔抗BSA10克RT

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 酰輔酶A 內(nèi)鹽 ≥93% (HPLC) (-20℃) ccqtyl coqnzymq c wo7ium sclt 1009-73-

MDA-MB-436 人腺癌細胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-50 Fine 9048-71-9 100G 分離試劑

NCI-H358人非小細胞細胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSwo7iumGluconate葡萄糖酸鈉*白色至微黃色精細結(jié)晶RTsigma

KITLG Protein Human 重組人 SCF / C-kit ligand 蛋白 (aa 1-189, His 標簽)(甘油)
鼠頰黏膜鱗癌細胞形態(tài)TE671 subline No.2細胞，人橫紋肌細胞 化膿性鏈球菌 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1妥布霉素ATobramycin A質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 標簽)生物素基妥布霉素酰胺Biotinyl Tobramycin Amide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

LS-174T(人腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRNP / Prion 人細胞裂解液 (陽性對照) 妥布霉素硫酸鹽Tobramycin sulphate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1氘化妥布霉素Tobramycin Deuterated質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸拓撲替康標記 d6Topotecan  Labeled d6質(zhì)量規(guī)格：美國進口