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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | |
品牌 | 莼試 |
貨號(hào) | CSX3431 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 詳見說(shuō)明書 |
細(xì)胞形態(tài) | |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 是 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說(shuō)明書 |
器官來(lái)源 | 詳見說(shuō)明書 |
免疫類型 | 詳見說(shuō)明書 |
品系 | 詳見說(shuō)明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | |
物種來(lái)源 | 詳見說(shuō)明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說(shuō)明書 |
純度 | 詳見說(shuō)明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞說(shuō)明書冷凍保存細(xì)胞之方法:
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟:
資源名稱 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞說(shuō)明書
種屬:MEF (CF-1) IRR
安全等級(jí):1
模式菌株:未知
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:The base medium for this cell line is ATCC-formulated Dulbecco's Modified Eagle's Medium, Catalog No. 30-2002. To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: •fetal bovine serum to a final concentration of 15%
細(xì)胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒(méi)操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過(guò)后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程:
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是小鼠胚胎成纖維細(xì)胞說(shuō)明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
人角膜成纖維細(xì)胞 (HcorF)( 5×105 ) EPC, 大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞 Rattus銀杏內(nèi)酯B(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginkgolide B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人低分化;SK-LU-1VLup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[β-D-glucopyranosyl(1→4)[a-L-rhamnopyranosyl) (1→2)-a -L-arabinopyranosyl]oxy], (3β,4a)-)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CANX Others Human 人 CANX / Calnexin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) VHederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-(β-D-glucopyranosyl(1→4))-α-L-arabinopyranoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLGDC0994GDC-0994質(zhì)量規(guī)格:ERK1/2 抑制劑
RAW 264.7細(xì)胞,小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞 溶組織梭菌Closidium histolyticum 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3氨三乙酸Nitrilotriacetic acid質(zhì)量規(guī)格:AR
人內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL復(fù)壁碳納米管 40-60nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格:>97%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 5-15μm(length)
D341Med細(xì)胞,人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 藤黃微球菌/騰黃八疊球菌 貓腎細(xì)胞;CRFK復(fù)壁碳納米管 40-60nm(直徑),1-2μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 1-2μm(length)
CCL3 Protein Mouse 重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白復(fù)壁碳納米管 60-100nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 60-100nm(diam.), 5-15μm(length)
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 EVI2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3,5-二芐氧基芐溴(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)3,5-Dibenzyloxybenzyl Bromide
小鼠色素瘤瘤株;B16復(fù)壁碳納米管 10-20nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格:>97%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 10-20nm(diam.), 5-15μm(length)
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元Cupricsubcaonate鹽基性碳酸銅5克CP,99%
表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB 人輸尿管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2-炔基 2-qTHYNYLPYRIDINq 1942-84-
人腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μgChromicacidfoginhibitor霧抑制劑500毫克AR
三.小鼠正常細(xì)胞L-TYROSINEL-酪酸美國(guó)藥典級(jí)25G60-18-4RT
小鼠髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;PIEC3687-31-8LEAD(II) ARSENATE
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞說(shuō)明書ANGPT2 Others Human 人 ANG2 / Angiopoietin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 溴鄰苯三酚紅Bromopyrogallol red質(zhì)量規(guī)格:IND
星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基ACM鹽酸副品紅Basic Fuchsin質(zhì)量規(guī)格:BS,用于生物學(xué)染色
CD164 Others Human 人 CD164 / Endolyn 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 燦爛黃Brilliant Yellow質(zhì)量規(guī)格:IND
GPS5 豚鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞剛果紅(AR)Congo red質(zhì)量規(guī)格:AR
CM-R123大鼠角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鈣羧酸指示劑(AR)Calconcarboxylic acid質(zhì)量規(guī)格:AR
收到小鼠胚胎成纖維細(xì)胞說(shuō)明書處理方法
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。