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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3338 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細(xì)胞形態(tài) | 多角 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
細(xì)胞培養(yǎng)過程:
冷凍保存細(xì)胞之方法:
人非小細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
資源名稱 人非小細(xì)胞培養(yǎng)
種屬:NCI-H157
形態(tài):多角
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;10mMHepes+1mM丙銅酸鈉
傳代方法:1:3傳代;5~7天1次。
生長特性:貼壁生長
存儲條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟:
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
收到人非小細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是人非小細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184苯并[g,h,i]芘(標(biāo)準(zhǔn)品)Benzo[ghi]perylene質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
BHK細(xì)胞,幼倉鼠腎細(xì)胞 人*癌細(xì)胞,CFPAC-1細(xì)胞 CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL1-十八1(標(biāo)準(zhǔn)品)1-Octadecene質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
大鼠*外分泌腺細(xì)胞;AR42J辛胺(標(biāo)準(zhǔn)品)n-Octylamine質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十八烷(標(biāo)準(zhǔn)品)Octadecane質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
人骨骼肌成肌細(xì)胞cDNAHSkMM cDNA2-辛酮(標(biāo)準(zhǔn)品)2-Octanone質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1丹酚酸C(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Salvianolic acid C
PTPN12 Others Human 人 PTPN12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丹酚酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Salvianolic acid D
腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)膽(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cholesterol
散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21 人成纖維細(xì)胞,Hs 578Bst細(xì)胞 HO-8910PM(高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)膽質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCholesterol
人結(jié)細(xì)胞;T84丹蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定1,8-Dihydroxyanthraquinone
人臍帶單核細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL親和硅烷shēng huà shì jì容量:25000u
143TK細(xì)胞,人胸腺激酶缺陷性細(xì)胞系 鼠傷寒沙門氏菌Ta100 大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1減藍(lán)6B;減性藍(lán)6B;六藍(lán)光減染天藍(lán) clkcli bluq 6B;Nicholson bluq;Triphqnyl tricMinotriphqnylccrbinol sulfonic ccid wo7ium sclt;C.I.42765 134-80-7
CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)溴化青;青化溴 Cycnogqn broMidq 206-68-3
MG-63(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液shēng huà shì jì容量:1公斤
犬胸腺細(xì)胞;cf2ThCollagenII 1g Worthington原裝
人非小細(xì)胞培養(yǎng)原代神經(jīng)元細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml鹽酸伊立替康-d10Irinotecan-d10 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18] 大鼠卵巢顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸卡那霉素Kanamycin sulfate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
EMT-6 小鼠癌卡那霉素AKanamycin A質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
ERBB2 Others Rhesus 恒河猴 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 卡那霉素B硫酸鹽Kanamycin B sulfate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6卡那霉素A硫酸鹽Kanamycin A Sulfate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口