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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

冷凍保存細(xì)胞之方法：
人皮膚鱗狀 細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱(chēng)　人皮膚鱗狀 細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)
種屬:Colo-16

類(lèi)型:貼壁生長(zhǎng)

形態(tài):細(xì)胞為不規(guī)則形態(tài)

提供形式:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級(jí):2

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉）+10%FBS

生長(zhǎng)條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲(chǔ)條件:90%FBS+10%DMSO 液氮

細(xì)胞分類(lèi)：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶(hù)。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿(mǎn)培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶(hù)，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到人皮膚鱗狀 細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是人皮膚鱗狀 細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品：
CM-R024大鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL蝙蝠葛諾林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Daurinoline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1 小鼠小腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯化木蘭花堿Magnoflorine chloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 Mouse木蘭花堿Magnoflorine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

SPARC Others Mouse 小鼠 SPARC / BM-40 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 化木蘭花堿Magnoflorine iodide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人橫紋肌細(xì)胞;A-204去甲烏藥堿鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Higenamine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠紅細(xì)胞;MELBGJ398(NVP-BGJ398)質(zhì)量規(guī)格：>98%,FGFR抑制劑BGJ398(NVP-BGJ398)

IGSF11 Others Human 人 IGSF11 / BTIGSF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) BMN-673質(zhì)量規(guī)格：>98%BMN673

MDA-MB-231 人癌細(xì)胞星孢菌素質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分Staurosporine

SK-BR-3人腺癌細(xì)胞 SK-BR-3 human breast adenocarcinoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS苯唑西林鈉質(zhì)量規(guī)格：>850μg/mg,BROxacillin

MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白鈣黃綠素乙酰甲酯質(zhì)量規(guī)格：>95%,美國(guó)進(jìn)口原裝Calcein-AM
人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞蜂蠟shēng huà shì jì容量：500毫克

CTLL-2細(xì)胞，小鼠T細(xì)胞 人細(xì)胞,9L-B細(xì)胞 人絨毛間葉成纖維細(xì)胞RNAHVMF miRNA5 μg沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基 Chromogqnic Sclmonqllc cgcr Bcsq

恒河猴皮膚細(xì)胞;RM-S1聚乙二醇 4000 Poly(ethylene glycol) 4,000 (PEG 4000) 25322-68-3 250G 通用試劑

EPHB2 Others Human 人 EphB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 蛋白保護(hù)劑TYshēng huà shì jì容量：5克

人腸微內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHIMEC NAD-Glucose-1-PhosphateNa2 250mg/1g/5g/25g原裝 Sigma G7000
人皮膚鱗狀 細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)CM-M019小鼠腮腺細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL*度酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Etodolac質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠瘤細(xì)胞;EL4 小鼠*上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL*孕1Etonogestrel質(zhì)量規(guī)格：>98%

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse依維莫司Everolimus;RAD001質(zhì)量規(guī)格：>95%,mTOR抑制劑,BR

ACRV1 Others Human 人 SP-10 / ACRV1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 醋酸氟輕;醋酸膚輕Fluocinolone Acetonide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

正常小鼠Sertoli細(xì)胞;TM4醋酸氟輕;醋酸膚輕(標(biāo)準(zhǔn)品)Fluocinolone Acetonide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品