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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 凍存則用3mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為3支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3233 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | CM2-1培養(yǎng)液中,貼壁,成纖維細胞樣,伸展的比較大 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
資源名稱 人正常細胞
種屬:CCD-18Co
類型:貼壁生長
形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中,貼壁,成纖維細胞樣,伸展的比較大
分離基物:有限細胞系,女性,2M17D
提供形式:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶1瓶;或者凍存形式:2ml凍存管2支,干冰費另計。
安全等級:1
模式菌株:未知
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS
傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細胞剛有脫落時,則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養(yǎng)箱消化,約1min取出。傳代用12mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可分2~3皿培養(yǎng);
生長條件:37℃,5%CO2,CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培養(yǎng)基,含谷氨酰胺。
存儲條件:凍存則用3mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為3支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
人正常細胞形態(tài)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
產(chǎn)品名稱 | 類型 | 佛號 |
人正常細胞形態(tài) | 貼壁生長 | CSX3233 |
培養(yǎng)操作步驟:
人正常細胞形態(tài)1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品:
人肝永生化細胞;THLE-3 人*微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL蛋白激酶C(19-36);蛋白激酶C選擇性抑制蛋白Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人口腔角質(zhì)細胞RNAHOK miRNA5 μg蛋白激酶C(530-558)Protein Kinase C (530-558)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲狀旁腺激素相關蛋白拼接同種型3(104-173),人pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
豬腎細胞;LLC-PK1甲狀旁腺激素(13-34),人pTH (13-34) (human)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
THC-8307細胞,人高分化腺癌細胞系 人低侵襲性脈絡膜色素素瘤細胞,OCM-1A細胞 綠色熒光蛋白標記人細胞;MGC803-GFP甲狀旁腺激素(3-34),牛pTH (3-34) (bovine)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
中國倉鼠卵巢細胞(亞系*); EPO-CHO-T孟魯司特質(zhì)量規(guī)格:美國進口Montelukast Ether
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WPS1 胎盤絨毛癌細胞,JAR細胞 Sf-21細胞,昆蟲細胞系孟魯司特亞砜(非對映)質(zhì)量規(guī)格:美國進口Montelukast Sulfoxide(Mixture of Diastereomers)
人羊膜細胞;WISH二氫孟魯司特鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Dihydro Montelukast Salt
HA Others H4N6 甲型 H4N6 (A/Swine/Oario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 25-羥基孟魯司特質(zhì)量規(guī)格:美國進口25-Hydroxy Montelukast
主動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)?;蝗?/span>-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口Furosemide Acyl-β-D-glucuronide
615小鼠T細胞性瘤株;L79122,4-二硝基本25克
INHBB Others Human 人 Activin B 人細胞裂解液 (陽性對照) Z-甘酰-L-脯酰-... Z-Gly-Pro-Arg PNA acetate salt 102679-70-9 5MG 通用試劑
人胚;WI-38 [WI38]甘精胰島速 Insulin, huMcn 11061-68-0
FCRL1 Others Mouse 小鼠 FCRL1 / FCRH1 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸錳shēng huà shì jì容量:100克
人腎成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL979-88-42,2’-雙-4,4’-二羧酸二鉀鹽2,2'-Biinoneoline-4,4-dicarboxylic acid diwo7ium salt
人正常細胞形態(tài)EGFR Others Human 人 EGFR / ErbB1 人細胞裂解液 (陽性對照) 運動升壓素Kinetensin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
豬腎傳代細胞;IBRS-2層粘連蛋白(925-933)Laminin (925-933)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CCL21 Others Cynomolgus 食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 層粘連蛋白(929-933)Laminin (929-933)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CL-0145LS-174T(人腺癌細胞)5×106cells/瓶×2層粘連蛋白九肽,酰胺Laminin Nonapeptide, Amide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
EC109,人細胞 順鉑耐藥株,SKOV-3/DDP細胞 SW1353(細胞)白細胞焦激肽(4-8);Pheromonotropic五肽Leucopyrokinin (4-8);Pheromonotropic Pentapeptide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR