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冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞 RatFat:NormalVisceralFatCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞 RatFat:NormalVisceralFatCells說明書！

大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞 RatFat:NormalVisceralFatCells

     產(chǎn)品描述：大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞主要存在于結(jié)締組織中，能夠合成和貯存脂肪。成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形，胞漿內(nèi)富含脂滴。脂肪細(xì)胞在脂類代謝，能量平衡以及抵等方面起重要作用，與，、、乳癌等多種生理疾病密切相關(guān)。公司提供的大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞，采用組織塊培養(yǎng)法制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatFatPrimaCell:NormalVisceralFatCellsCatNo.3-7568)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。
 

【培養(yǎng)指南】
大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞 RatFat:NormalVisceralFatCells對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHCMEC cDNA溴化膽固醇,從牛脂來(>98.0%(T))Cholesteryl Bromide from Beef Fat質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

SLPI Others Human 人 SLPI 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 膽固醇壬酸酯(>89.0%(GC))Cholesterol Pelargonate質(zhì)量規(guī)格：>89.0%(GC)

大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6膽固醇壬基碳酸酯Cholesterol Nonyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：

95-D細(xì)胞，高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人細(xì)胞,M2e細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK膽固醇庚基碳酸酯Cholesterol Heptyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2膽固醇油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))Cholesterol Oleyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：>70.0%(HPLC)

NCI-H1650細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,RM-1細(xì)胞 CM-R031大鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL比卡魯胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Bicalutamide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Raji(人Butt's細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2白消安Busulfan/Myleran質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Promocell C-28050 DC Generation Medium, 樹突狀細(xì)胞生成培養(yǎng)基(即用型) 250ml白消安（標(biāo)準(zhǔn)品）Busulfan/Myleran質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)洛莫司汀Lomustine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

TNFRSF12A Others Human 人 TNFRSF12A / FN14 / TWEAKR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 洛莫司?。?biāo)準(zhǔn)品）Lomustine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人成纖維細(xì)胞-心室HCF-av奈拉濱質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,細(xì)胞培養(yǎng)級Nelarabine

gpc-1細(xì)胞，人細(xì)胞 兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞,RYTF細(xì)胞 大鼠背脊髓神經(jīng)元RN-dsc醋酸奈西立肽質(zhì)量規(guī)格：>95%Nesiritide Acetate

K7M2 wt(小鼠成骨細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硫酸鎂七水(分子生物學(xué)級)質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物Magnesium sulfate, heptahydrate

A-431(人表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H131人角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人羊膜細(xì)胞;HA糖化酶;葡萄糖淀粉酶質(zhì)量規(guī)格：BR,10萬u/GGlucozyme

CM-R007大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL聚乙二醇4000質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRPEG 4000

大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞 RatFat:NormalVisceralFatCells人真皮成纖維母細(xì)胞-HDF-a2'-(二芐氨基)-6'-(二乙氨基)熒烷(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran

CGB5 Others Human 人 CGB5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3',6'-二甲氧基熒烷(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)3',6'-Dimethoxyfluoran

家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC1,1'-亞甲基二-2-萘酚(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)1,1'-Methylenedi-2-naphthol

二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr- 細(xì)胞，TE-11細(xì)胞 B82細(xì)胞，鼠細(xì)胞系2-萘基芐基醚(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Benzyl 2-Naphthyl Ether

B16-F10, 小鼠高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Mouse5-溴吲哚 質(zhì)量規(guī)格：>99%5-Bromoindole

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。