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| 產地 | 進口、國產 |
| 品牌 | 上海莼試 |
| 貨號 | CS-X0177 |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 保質期 | 詳見說明書個月 |
產品名稱:人腦微內皮細胞,HBMEC細胞說明書
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1)來源:人腦部
2)形態(tài):貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人腦微內皮細胞,HBMEC細胞說明書細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備基礎培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
1.一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
人腦微內皮細胞,HBMEC細胞說明書細胞出現問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
LGALS1 Protein Human 重組人 Galectin-1 / LGALS1 蛋白
NCI-H1395 人
IGSF3 Others Human 人 IGSF3 / EWI-3 人細胞裂解液 (陽性對照)
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞細胞
人EB病毒轉化的B細胞;CGM1
人肝細胞;QSG-7701 [QSG7701] 人上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
CL-0239U-937(人組織細胞細胞)5×106cells/瓶×2
NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠淋巴管內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
B16-F10小鼠皮膚細胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
IL1RN Protein Human 重組人 IL-1RA / IL1RN 蛋白
PLC/PRF/5(人亞力山大細胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚腎細胞)
LGALS1 Protein Human 重組人 Galectin-1 / LGALS1 蛋白
NCI-H1395 人
IGSF3 Others Human 人 IGSF3 / EWI-3 人細胞裂解液 (陽性對照)
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞細胞
人EB病毒轉化的B細胞;CGM1
人肝細胞;QSG-7701 [QSG7701] 人上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
腦—心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基28360廣泛用于霉菌、酵母、細菌的培養(yǎng),包括營養(yǎng)要求較高的微生物的培養(yǎng),特別用于飲用天然礦泉水和城...
DRBC 瓊脂基礎 (CM0727) Oxoid incubation media DRBC 瓊脂基礎 (CM0727) Oxoid
橢圓釀酒酵母 支/瓶
VRB-MUG瓊脂用于大腸桿菌的固體平板檢測(GB標準)
亞瓊脂 250g 用于桿菌培養(yǎng)
尿素酶瓊脂基礎250g生化培養(yǎng)基,用于細菌脲酶檢測(GB、SN標準)
Mediaforisolationofmagnetotacticbacteria
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 Lactose Peptone Broth 250 用于飲用水,水源水中總大腸菌群的測定(GB標準)
HB培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)incubationmediaHB培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)
FB1(Half-Fraser)添加劑(A、B) 2ml/支*40 每支添加到225ml HBJ006中
人腦微內皮細胞,HBMEC細胞說明書Sodiumlaurylsulfateagar
Dichloran Rose-Bengal Chloramphenicol Agar Dichloran 1.00466.0500 MERCK默克 incubation media Dichloran Rose-Bengal Chloramphenicol Agar Dichloran 1.00466.0500 MERCK默克
GVC增菌液 250g 用于椰毒假單胞菌酵米面亞種的增菌培養(yǎng)基
C57BL/6小鼠脂肪間質干細胞成脂誘導分化培養(yǎng)基C57BL/6mouseadiposemesenchymalstemcellsintotheculturemediuminduceddifferentiationoffat
TrypticaseSoy-YeastExtractBroth