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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號 | CS-X0046 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個月 |
產(chǎn)品名稱:大鼠心肌細胞,CRL-1446細胞規(guī)格
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1) 來源:大鼠心肌細胞,CRL-1446細胞
2) 含量:>1x106 個/mL
3) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
大鼠心肌細胞,CRL-1446細胞規(guī)格細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),85%;馬血清10%,優(yōu)質(zhì)胎牛血清5%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:70%FBS,20%HS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為類;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
大鼠心肌細胞,CRL-1446細胞規(guī)格細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
CL-0443SK-N-MC(人神經(jīng)上皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2
NLGN1 Others Mouse 小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠角膜內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
MDBK (NBL-1)牛腎細胞 MDBK (NBL-1) of bovine kidney cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IL18 Protein Mouse 重組小鼠 IL18 / IL-18 蛋白
NCI-H524(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 MCF7(癌細胞)
CL-0440SK-MEL-1(人皮膚細胞)5×106cells/瓶×2
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照)
人上皮細胞RNAHBEpiC miRNA5 μg
BIU-87細胞,人細胞 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染了neor和LIF基因的STO細胞株,SNL細胞 CSC, 小鼠心肌細胞
M1(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2
NHEK adult single donor Pellet 正常人類表皮角質(zhì)細胞團塊(捐獻者) > 1 mio.cells 小鼠腎小管上皮細胞MREpiC
ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
頜下腺上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人侵襲性脈絡(luò)膜細胞;M619
敘利亞倉鼠肌肉細胞;GH-M1 豬髖動脈內(nèi)皮細胞,PIEC細胞 CRL-1548細胞,大鼠細胞
人羊膜細胞;HA
CD68 Others Human 人 CD68 / Macrosialin / Gp110 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠瘦素受體(Leptin receptor)ELISA試劑盒 ,英文名: Leptin receptor ELISA Kit
牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA檢測試劑盒BovinesecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit 96T/48T
人6酮素F1a(6-keto-PGF1a)免疫試劑盒 Human 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit
英文名稱MouseIerleukin-15,IL-15ELISAKIT小鼠白介素-15(IL-15)規(guī)格:96T/48T
冰凍切片組織CASPASE-4蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
RatcoagulationfactorⅢ,FⅢELISA試劑盒大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠/乳過氧化物酶(LPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat vasoactive iestinal peptide (VIP) ELISA Kit 大鼠活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
HumanAnnexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit 人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISA試劑盒人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織FGFR1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit人前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠心肌細胞,CRL-1446細胞規(guī)格小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒
Humancomplemeconolprotein,CCPELISAKit 人補體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-Histoneaibody,AHAELISA試劑盒人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物磷脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit人內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T